在神经退行性疾病领域，阿尔茨海默病（AD）的早期诊断依赖于脑脊液（CSF）中Aβ40/Aβ42蛋白的定量检测。刘长春团队开发了一种CRISPR/Cas12a驱动的适配体传感器［66］，通过利用适配体与Aβ蛋白特异性结合，释放DNA激活剂以触发Cas12a的反式切割活性，从而实现对CSF中Aβ40和Aβ42的超灵敏检测。结合Aβ42/Aβ40比值，其模块化设计为其他标志物检测提供了通用框架［图6（a）］。在心血管急症诊断中，心肌肌钙蛋白I（cTnI）的快速检测对急性心肌梗死（AMI）至关重要。南京大学张晶晶课题组提出了一种双适配体转录扩增策略（DATAS-Cas13d），通过双适配体结合cTnI触发体外RNA转录，激活Cas13的RNA切割活性，在血清中实现9.3 pM的灵敏度，成本仅为ELISA的一半［67］。该传感器在10%人血清中的检测限为0.67 ng/mL，且对干扰蛋白（如肌红蛋白）展现出良好的特异性差异，凸显其在急诊应用场景中的实用性与优势［图6（b）］。除了适配体传感器外，CRISPR技术进一步拓展至蛋白酶活性监测及复杂样本的检测。笔者团队针对癌症进展中的关键蛋白酶，例如基质金属蛋白酶2（MMP-2），开发了一种蛋白酶触发转录激活与CRISPR/Cas12a系统联用的新型检测体系，称为PR-Cas［68］。通过设计蛋白酶激活的RNA聚合酶，将单个蛋白酶切割事件转化为多拷贝gRNA输出［图6（c）］，结合Cas12a的反式切割活性，实现飞摩尔级灵敏度。该系统成功应用于临床血清样本中MMP-2活性分析，为癌症转移监测提供了新工具。

面对痕量蛋白在复杂生物基质（如全血、汗液）中的检测挑战，Ewa Goldys团队提出了CRISPR/Cas12a辅助的光纤免疫传感器［69］。通过抗体-适配体夹心结构捕获目标蛋白γ干扰素（IFN-γ），并触发Cas12a切割荧光报告分子［图6（d）］，CAFI在100 μL样本中实现1 fg/mL（58.8 aM）的检测限，较ELISA灵敏度提升千倍。该系统在血清、全血、唾液等多种样本中均表现优异，且通过替换抗体/适配体可适配多目标检测。CRISPR技术通过适配体传感器、蛋白酶活性监测及光纤传感等多元化策略，突破了传统蛋白检测的灵敏度与样本适应性限制。未来，进一步整合便携式设备、多种标志物联检及体内实时监测能力，将推动CRISPR蛋白传感器向临床转化迈出关键一步，为精准医疗提供底层技术支撑。